Ploskireva médium (Bacto-agar F): popis. lekárska mikrobiológia

Ploskireva médium (ďalej len ešte Bacto agare F) je živné médium pre kultiváciu určitých mikroorganizmov, predovšetkým Shigella a Salmonella. Ako zdroj pre svoje materiály infikovaných Využitie: moč, žlč, výkaly.

príbeh

Nikolaj Ivanovič Ploskirev - Sovietsky mikrobiológ a ctený lekár. Narodil sa v roku 1869 a zomrel v roku 1948 po tom, čo pracoval väčšinu svojho života vo svojom rodnom meste - Tomsk.

V roku 1888, on, budúce vedca, bez toho aby dokončil šiesty stupeň školy, vstúpil do armády. bol schopný dokončiť výcvik iba v roku 1892, potom zložil skúšky pre prijatie do Imperial Tomsk univerzite študoval na lekárskej fakulte. V roku 1898 získal titul doktora.

Ploskirev zúčastnil rusko-japonskej vojny, a potom, čo pracoval v nemocnici Tomsk. V roku 1910 bol menovaný do funkcie vedúceho Tomsk dermatologického a pohlavné nemocnici a po dobu tridsiatich rokov bola jeho stála hlava. Rovnaký vedec bol jedným zo zakladateľov STI kliniky v Tomsku.

Nikolaj Ivanovič Ploskirev napísal rad diel venovaných boju proti pohlavnými chorobami.

štruktúra

Streda Ploskireva - materiál pre pestovanie črevných baktérií, a preto musí obsahovať niekoľko druhov živín. Vyrába sa v suchej forme.

Pomerne veľká časť jeho celkovej hmotnosti je pankreatický hydrolyzát šproty (10,4 g / l). O niečo menej predstavovali hydrocitrate fosforečnanu sodného (8,5 g / l). Tiež tam je suchý živnej pôdy a mliečny cukor (8,62 a 7,3 g / l).

Druhý titul Ploskireva médium - J. Bacto-agar v prostriedku je prítomný v množstve od agaru, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo bezvodý obsah sodíka sa rovná 5,1 g / l. Tam je prítomnosť bezvodého hydrogénfosforečnanu sodného - 2,1 g / l, sodné soli kyseliny cholánovej asi 3,46 g / l a sóda - 2,4 g

Menej ako gram v nich obsiahnuté ukazovatele - neutrálna červeň (0,05) a brilantný zelene (0,0002). Obsah jódu - 0,13.

prihláška

Štúdium biochemických procesov baktérií hrá veľmi dôležitú úlohu v diagnostike chorôb, ktoré spôsobujú anaeróbne organizmy. Druhy v tejto rodine - stovky. Sú v morfológiu a kultúrnych vlastností, a najspoľahlivejší spôsob, ako odlíšiť od seba takmer totožné - je štúdium biochémie.

Štúdia začína očkovaním patologického materiálu do kultivačného média. Ona patologický rozdiel pre koliformných baktérií a jeho súčastí, okrem prostého agaru, zahŕňa svetlo a laktózu. Spracovanie schopnosť laktózy - dôležitým znakom diferenciáciu enterobaktérií. Ak je toto objavené, hodnota pH sa posunie smerom k kyslosti a je aktivovaný ukazovateľ, ktorý zmení kolóniu.

Ostatné krajiny môžu používať iné živnej pôde, ale ich mechanizmus účinku zodpovedá tri najbežnejšie v Rusku - toto prostredie Endo a Levine Ploskireva prostredie.

opis metódy

V zahraničí Ploskireva analóg médium je tzv MacConkey agar. V konečnej podobe transparentného roztoku, má svetlo ružové-žltej farby. Kolónie schopné spracovať laktózu, medzi Ploskireva získa červená (brusnicová) farbu. V prípade, že baktérie nemôže spracovať ju, alebo kolónie je bezfarebný alebo má slabý farbu.

Vzhľadom na to, že zloženie média zahŕňa látky Ploskireva inhibítory (brilantný zeleň, žlčové soli, jód), to je takmer úplne inhibuje rast grampozitívnych flóry, rovnako ako v prvý deň eshehiry významne spomaľuje rast, ako aj ďalšie obvyklé súčasne mikroflóru.

druhá noha

Ďalšie záujem je výber kolónie, a to sa naočkuje na primárne pamäťové médium a diferenciácie. Prostredie, v ktorom je siatie by mal obsahovať viac substrátov. Bakteriálna kultúra by mal detekovať enzymatickú aktivitu vo vzťahu k nim, na rovnakej médium umiestnené v rúrkach tak, že existujú dve miesta:

• taká, v ktorej šikmé agar;
• s kolónou.

Záujem bádateľov v osade obývaných skosená časť hustého mŕtvice a v stĺpci - blbec. V tejto fáze sa médium Russell, Kligler alebo Olkenitskogo. Ako diferenciálnu diagnostiku a použité Ploskireva stredu.

Mikrobiológie a patogénne organizmy

Agar Ploskireva je dôležitým faktorom pri detekcii infekcií spôsobených baktériou čeľade Enterobacteriaceae. Tak napríklad sa pestuje a diferencované kolónie mikroorganizmov, ktoré spôsobujú bacilárna úplavici. Táto anaeróbne organizmy, ktoré patria do rodu Schigella.

Tak ako každý, kto je súčasťou skupiny črevných baktérií, Shigella majú tvar tyčí, vo veľkosti dvoch mikrometrov. Nepredstavujú kapsuly a spory majú bičíky - umožňuje, aby boli odlíšené od Salmonella, ktorý, podľa poradia, sú mobilné telefóny. Rastú dobre na väčšine jednoduchých médiu, pri teplote mierne nad teplotou okolia (35-37 ° C) a 7,4 pH. Podľa charakteru rastu, kolónie nelíši od Salmonella.

Ako bolo uvedené vyššie, môžu byť v podstate mikroorganizmami morfologické rozdiely sa však značne líšia v biochemických procesov života. Tak, s výnimkou Shigella Nyukestl, bez tvorby kyslého plynu dochádza v priebehu fermentácie sacharidov. S výnimkou Shigella sonnei, nemôžu kvasiť laktózu, ale sa štiepi glukózu. Len preto, aby ich kľúčových funkcií, môžete nosiť, čo môžu znížiť niraty na dusitan. Ich kolónie boli štiepené s močovinou, ako aj v živnej pôde nie je skvapalnenie želatíny.

Zber a spracovanie osiva

Pre detekciu činidiel úplavica, sú potrebné mikrobiologické testy zamorené prostredie, tj stolice pacienta. Po obdržaní materiálu, je potrebné čo najrýchlejšie urobiť siatie. Ak to nie je možné, musí byť zdroj umiestnený do konzervačné činidlo - fosfátové pufrový zmesi alebo glycerol. Pri 4 ° C, sa môžu skladovať dlhšie ako jeden deň. Zbierať materiál musí byť vykonaná pomocou rektálne sklenené trubice, ktorá je vložená do konečníka.

Pre štúdie z materiálu vybraného hnisavý hlienu častí, ktoré majú prať v dvoch až troch rúrok izotonickom roztoku chloridu sodného.

Aplikácia patogénnych baktérií v prostredí Ploskireva urobil sklenenou špachtľou. Treba trieť na malú časť svojho agaru, potom odtrhnúť špachtľa na životné prostredie, a zvyšný materiál sa vtiera do osevné plochy. Ak je očkovanie vykonané v niekoľkých šálky, potom sa ku každému z nich je potrebné založiť novú dávku.

Ak sa pri prijímaní na vyhradenom analýzy Muko-hnisavé kusov, neznamená to, že neexistuje žiadna prítomnosť patogénov. V takom prípade je nutné, aby emulgovať výkaly vo 10 ml roztoku chloridu sodného (koncentrácia 0,85%) a potom zasiať jednu alebo dve kvapky na médiu Ploskireva. Neemulgované stoličky môžu byť zasiate do selenitovy vývaru. On tiež používa, ak je miesto na výkaly sú zvratky či výplachy.

mikrobiologická diagnostika

V prvej fáze mikrobiologických štúdií vykonaných siatie patogénnych baktérií v dvoch šálok, potom sa pozerať, ako pestovať Shigella. V stredu Ploskireva produkoval plodiny, a druhý - na životné prostredie alebo Endo Levin.

Vzhľadom k tomu, že existujú kmene Shigella sú rezistentné na antibiotiká, aby sa médiá doplnené s chloramfenikolom. Potom nastane v dňoch inkubácie v inkubátore pri teplote 37 ° C

Na druhý deň, aby preskúmala pestované kolónie. Tie, ktoré nie sú na diagnostickom médiu diferenciálnej pestované bezfarebný, je nutné vyradiť Russellov stredné alebo krátke "nesúrodú riadok." Ďalší výskum je vykonávaný pomocou algoritmu podľa hlavných plodín na ne. Kolónie Shigella v stredu Ploskireva rastú v podobe priehľadnej, bezfarebné a malých kolónach. Sú dva typy:

• sploštené sa zubatými okrajmi;
• zaoblený, konvexné, s typickou mokré lesk.

Tri alebo štyri kolónie musia byť mikroskopirovat a vyšetrujú na mobilitu. Pokiaľ tento neukáže, že premiestnil v stredu Olkenitskogo izolovať čisté kultúry. V neprítomnosti charakteristické kolónie Shigella alebo, ak je žiadny rast pozorovaná vôbec, je nutné Endo agare alebo Ploskireva potravinársky siatie selenitovogo vývaru. Ak sú prítomné v dostatočnom počte typickej kolónie, dal odhadovanú aglutináciu. Zmes sera sonnei a flexneri, reakcia prebieha na sklo.

ďalší výskum

Na tretí deň dochádza k zmenám, ku ktorým došlo v kolóniách na médiu Russella. Ak je kultúra, ktorá nezhoršuje laktóza, glukóza fermentuje za vzniku kyseliny, sa oddelí a analyzujú, strávi mikroskopia, ako aj vykonávať siatie v "pestrej rade," ale tentoraz rozšírený. Stačí dať aglutinačný reakcie, aby sa sérologickou identifikáciou.

V posledný deň, môže byť uzavretá na základe zmien v "nesúrodým číslo" (v prípade, že sa fermentácia sacharidov), ako aj zhŕňa aglutinačné reakciu.

Skladovanie a príprava

Príprava agaru Ploskireva prebieha nasledujúcim spôsobom:

1. 55 g suchej látky sa mieša v litri destilovanej vody.
2. Sa varí po dobu dvoch až troch minút, kým sa agar ešte nie je úplne roztavený.
3. Sa vyleje do Petriho misiek (sterility voliteľné) vrstvy 5-6 mm.
4. Dosky sú ponechané otvorené na pol hodiny pri teplote miestnosti (18-25 °). Po tejto dobe sa médium je dostatočne stvrdnúť a suché.

Streda Ploskireva fotosenzitívne a hygroskopické. Prášok by mal byť uložený v uzavretom obale, relatívna vlhkosť vzduchu v miestnosti nesmie byť vyššia ako 60%. Optimálna teplota pre skladovanie 2 ° C až 25 ° C Skladovanie musí byť v súlade s týmito pravidlami, inak je možné nepresné výsledky.